세르푸호프(러시아어: Серпухов)는 러시아 모스크바주 세르푸호프스키 군에 있는 도시이다. 모스크바에서 남쪽으로 99km 떨어진 오카 강변에 위치한다. 인구는 127,555명(2010년 기준)이다.
세르푸호프는 1339년에 처음 언급되었으며, 14세기 후반부터 모스크바 대공국의 중요한 전초기지가 되었다. 16세기에는 크림 칸국의 침략을 여러 차례 격퇴하였으며, 17세기에는 폴란드-리투아니아 연방의 침략을 물리쳤다. 18세기에는 러시아 제국의 중요한 공업 도시로 발전하였다.
세르푸호프는 오늘날에도 모스크바 주의 중요한 산업 도시이다. 기계, 금속, 섬유, 식품 등을 생산한다. 또한, 세르푸호프에는 역사적인 건축물이 많이 남아 있어, 관광지로도 인기가 있다.
세르푸호프의 축구팀은 FC 세르푸호프이다. FC 세르푸호프는 1922년에 창단되었으며, 현재는 러시아 프로페셔널 풋볼 리그 2부인 러시아 내셔널 풋볼 리그에 참가하고 있다. FC 세르푸호프는 2015-16 시즌에 러시아 내셔널 풋볼 리그에 승격하였으며, 2016-17 시즌에는 러시아 내셔널 풋볼 리그 12위를 기록하였다.
FC 세르푸호프의 홈 구장은 세르푸호프 스타디움이다. 세르푸호프 스타디움은 1959년에 개장하였으며, 수용 인원은 2,100명이다.
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